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酸性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)為什么用10%甲醛溶液進(jìn)行固定

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酸性磷酸酶(acid phosphatase EC3.1.3.2)酸性磷酸酶是一種在酸性條件下催化磷酸單酯水解生成無機(jī)磷酸的水解酶。人血清酸性磷酸酶的最適pH為5~6,最適作用溫度37℃
在溶酶體膜穩(wěn)定完整時(shí),底物不易滲入,ACP活力微弱或無活性,經(jīng)固定,在合適pH條件下,膜本身變?yōu)椴环€(wěn)定,逐漸改變其滲透性,底物可以滲入,酶活力被顯示。[1]
ACP在酸性條件下(pH4.7)可使作用液中的底物β-甘油磷酸鈉的磷酸根解離出來,進(jìn)而與溶液中硝酸鉛結(jié)合形成磷酸鉛沉淀,因其是難溶解的無色沉淀物,需要與黃色的硫化銨作用,生成棕黑色PbS沉淀而被顯示出來。
正常人血清中的酸性磷酸酶來源于骨、肝、腎、脾、胰等組織,故不論男女老幼,其含量大致相同。而前列腺患者以及出現(xiàn)肝炎、甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)、紅血球病變等疾病時(shí),血清中酸性磷酸酶的活力都會(huì)升高。為了鑒別血清中增加的酸性磷酸酶是來自前列腺還是來自其他器官,必須加以區(qū)別。為此可進(jìn)一步采用某些抑制劑進(jìn)行選擇性抑制作用。例如:乙醇和酒石酸對(duì)前列腺酸性磷酸酶有顯著的抑制作用,而對(duì)紅血球酸性磷酸酶的抑制作用較弱。
故ACP測(cè)定主要用于前列腺癌的輔助診斷。
(1)前列腺癌:尤其是轉(zhuǎn)移癌ACP明顯升高。PAP對(duì)前列腺癌的診斷較ACP敏感,二者對(duì)晚期前列腺的診斷、療效觀察及預(yù)后監(jiān)測(cè)價(jià)值更大。
(2)血液?。?span>粒細(xì)胞白血病、高雪病、尼曼匹克病、原發(fā)性血小板減少性紫癜、溶血性貧血等ACP活性亦增高。
(3)非惡性前列腺疾病前列腺炎、前列腺肥大、前列腺梗死等ACP活性也增高。
(4)骨疾?。鹤冃涡怨茄住⒊晒遣蝗?、軟骨病、骨肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤及某些非前列腺惡性腫瘤的骨轉(zhuǎn)移,ACP活性也可升高。[1]
(5)其他:甲狀腺功能亢進(jìn),急、慢性腎炎、尿潴留等ACP活性可增高。