產(chǎn)品說明: 蘇木精-伊紅染色法 ( Hematoxylin-Eosin staining ),簡稱HE染色法,切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。 染色過程需要優(yōu)化,著色情況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,很多細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),伊紅著色由淺變深。本產(chǎn)品所包含試劑均為工作液,可直接使用。
操作說明: 石蠟組織切片的HE染色(以下步驟僅供參考)。1.取材組織塊,經(jīng)固定后,常規(guī)石蠟包埋,切片。2.切片用二甲苯脫蠟,經(jīng)各級(jí)乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸餾水洗2min。3.蘇木素染液染色5-20min(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間),自來水沖洗。4.分化液分化30s。5.自來水浸泡15min或溫水(約50℃)5min。6.置伊紅染液2min。7.自來水沖洗。8.常規(guī)脫水,透明,封片:95%乙醇(I)1min→95%乙醇(Ⅱ)1min→100%乙醇(I)1min→100%乙醇(Ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min→二甲苯(I)1min→二甲苯(Ⅱ)1min →中性樹脂封固,鏡下觀察。冰凍切片不用脫蠟,可固定后直接染色,其方法與石蠟切片相同。
【HE染色液注意事項(xiàng)】
1、涂片厚薄適宜,固定后方可染色。
2、冬季染色時(shí),A、C液的染色時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長。
3、固定液應(yīng)定期更換,以免固定不充分導(dǎo)致著色不佳。
4、染色液應(yīng)定期更換,以免影響染色效果。